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上海信帆播报:关于小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒的检测范围已及操作步骤

更新时间:2013-11-21      浏览次数:1189

上海信帆生物代理销售小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒,提供技术服务,免费代测!

该试剂盒检测范围: 2.5 pmol/L -80 pmol/L

操作步骤如下:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。

80 pmol/L

5 号标准品

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

40 pmol/L

4 号标准品

150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

20 pmol/L

3 号标准品

150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

10 pmol/L

2 号标准品

150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

5 pmol/L

1 号标准品

150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.    温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.    配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

重复 5 次,拍干。

6.    加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7.    温育:操作同 3。

8.    洗涤:操作同 5。

9.    显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

      15 分钟.

10.  终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后      15 分钟以内进行。

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